AG百家乐的研究团队，来自第三军医大学西南医院的唐康来、郭林、陈玉佳男，以及第三军医大学的缪洪明和纽约大学的刘传聚，联合在《Signal Transduction And Targeted Therapy》上发表了一项研究论文，标题为《Malate initiates a proton-sensing pathway essential for pH regulation of inflammation》。该研究揭示了三羧酸循环中的中间体L-苹果酸如何通过直接结合免疫球蛋白（BiP）来抑制炎症反应。

研究发现，L-苹果酸能够直接结合BiP，抑制BiP与干扰素调节因子2结合蛋白2（IRF2BP2）之间的相互作用，从而防止IRF2BP2被BiP驱动降解。在体外和体内实验中，L-苹果酸均表现出显著的抗炎作用。进一步研究显示，pH值的降低促进了L-苹果酸羧基的质子化，进而增强了L-苹果酸与BiP的结合，采用依赖羧基的方式抑制了BiP-IRF2BP2的相互作用。

在巨噬细胞中，BiP-IRF2BP2信号通路对pH变化极为敏感，能够介导抗酸性炎症及细胞内碱化剂所引发的促炎反应。此外，在小鼠的结肠中，经局部碱化的方式诱导结肠炎，发现这种方法能降低IRF2BP2的蛋白水平。本文的研究中，作者使用汉恒生物提供的HBLV-U6-gRNA-EF1-CAS9-PURO慢病毒载体，成功在Raw2647细胞中敲除了Hspa5和Mdh2基因，构建了Hspa5+/-和Mdh2-/-细胞系。

研究的主要发现之一是，L-苹果酸能够显著缓解体内外的炎症反应。通过对脂多糖（LPS）刺激的骨髓衍生巨噬细胞（BMDM）模型的分析，筛选出38种可溶性代谢中间体并进行qPCR检测，结果显示L-苹果酸具有最强的抗炎能力。此外，通过ELISA及Western blot（WB）实验确认，L-苹果酸能有效抑制IL-6和TNF-α的表达，且可降低IL-1β前体(pro-IL-1β)的水平。在内源性L-苹果酸水平提升的情况下，研究发现Mdh2的缺失能够增加细胞内L-苹果酸水平，并降低LPS诱导的炎症因子表达。

在小鼠体内实验中，注射L-苹果酸（200或400 mg/kg）后，小鼠在LPS急性炎症模型中显示出显著的存活率提升。在胶原抗体诱导的关节炎（CAIA）小鼠模型中，L-苹果酸同样减轻了关节肿胀和临床症状。此发现进一步证明了L-苹果酸在抗炎治疗中的潜力。

当研究分析L-苹果酸的抗炎作用机制时，发现其并不影响LPS刺激的巨噬细胞糖酵解，表明其抗炎效果不依赖于代谢变化。同时，利用DARTS实验分析发现，L-苹果酸能够直接与BiP作用，并保护BiP在蛋白质消化过程中的稳定性。此外，在经LPS刺激的巨噬细胞中，BiP的缺失会使pro-IL-1β的水平显著上调，进一步证明BiP在L-苹果酸产生的抗炎作用中的关键角色。

为深入探求L-苹果酸与BiP-IRF2BP2信号传导之间的关联，作者进行了系列试验。通过蛋白质微阵列开发，发现IRF2BP2是BiP结合的主要配体之一，且其与L-苹果酸的亲和性显著。在不同pH条件的下，L-苹果酸能够有效阻断BiP与IRF2BP2的结合。此外，证据还显示pH值的变化能显著影响BiP-IRF2BP2的信号传导，影响炎症反应。

综合以上结果，L-苹果酸通过BiP与IRF2BP2的轴线，来调节炎症反应，提示其在调控细胞内pH值及靶向BiP-IRF2BP2信号通路中可能具有重要的临床应用价值。该研究为理解代谢及免疫系统的相互作用提供了新的视角，同时也为治疗与炎症相关的疾病开辟了潜在的策略，而AG百家乐可能在这方面提供更多的支持和研究进展。