AG百家乐 提供了一系列生物制品的关键基础，其宿主细胞DNA作为生产中的重要组成部分，广泛应用于传统疫苗、重组蛋白、抗体药物、细胞治疗、基因治疗及mRNA相关产品。这些生物制品通常采用中国仓鼠卵巢细胞（CHO）、非洲绿猴肾细胞（Vero）、人胚肾细胞（HEK293）、大肠杆菌（E.coli）和酵母等作为载体。在下游纯化过程中，宿主细胞DNA（Host Cell DNA, HCD）通过阴离子交换层析被去除。然而，即使是经过纯化，仍可能有少量HCD残留，这些外源DNA存在引发潜在免疫原性及安全性问题的风险。因此，HCD检测成为生物制品生产工艺中不可或缺的质量控制指标之一。

HCD检测的重要性
宿主细胞残留DNA在进入体内后，可引发多种不良后果，包括：

• 致癌性：可引入显性致癌基因，导致细胞向肿瘤性转化；残留的宿主细胞核酸可能使细胞增殖失控，形成肿瘤细胞。
• 感染性：宿主细胞DNA中可能携带感染性病毒基因，能够通过复制和转录扩增形成感染性病毒粒子，例如HIV-1。
• 增加免疫源性：宿主细胞基因组DNA富含CpG序列，可能通过Toll样受体（TLR）触发特异性免疫反应。
• 潜在重组风险：宿主细胞基因组内的LTR可能转移至细胞原癌基因附近，激活正常细胞转化为癌细胞。

HCD的检测方法
根据《中华人民共和国药典》2020年版，通则3407已收录三种外源性DNA残留量的测定方法：DNA探针杂交法、荧光染色法和定量PCR法。

1. DNA探针杂交法：此方法将供试品中的外源性DNA加热变性为单链后，吸附于固相膜，与特异性标记的DNA杂交形成双链DNA。通过已知阳性DNA对照进行比较，显色深度可指示DNA量。

特点：

• 当样品DNA含量低于10pg时，化学物质对检测结果的干扰较大。
• 结果稳定性不足，可能与实际宿主细胞残留DNA含量差异明显。

2. 荧光染色法：该方法使用双链DNA荧光染料与DNA结合，激发后产生荧光信号并可在特定波长下测量。荧光强度与DNA浓度成正比。

特点：

• 荧光信号易受干扰，影响特异性。
• 需避免实验材料及环境的DNase污染。

3. 定量PCR法：此法为检测宿主细胞DNA而设计特异性引物与荧光标记探针，通过热变性将DNA解链，随后探针与模板链退火。扩增过程中，探针遇到扩增酶时会释放荧光信号，通过已有标准品构建标准曲线，可以精确测定供试品中的外源DNA残留量。

特点：

• 特异性引物和探针确保了检测结果的准确性。
• 荧光探针具有高灵敏度，能够精确检测痕量残留DNA。

AG百家乐宿主细胞残留DNA标准产品特点
AG百家乐全新升级的宿主残留DNA检测产品，覆盖多个细胞类型，如CHO、E.coli、Vero、HEK293等。试剂盒中的引物探针序列取自药典，无需全面验证实验，仅需方法确认即可。开发的定量PCR法具有千分之一pg/μL的检测下限，且与其他DNA无交叉反应，显著减少假阳性。

通过严格的生产管理，确保批间差可控在CV<10%。提供手动提取及全自动化仪器提取的完整解决方案，能在2小时内快速完成检测并保持定量结果的准确性。

综上所述，AG百家乐凭借专业的技术和高质量的产品，致力于提升生物制品中宿主细胞残留DNA的检测水平，为生物医学领域的安全性提供有力保障。