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原代细胞分离培养基本流程 - AG百家乐生物医疗指南

来源:倪颖澜 日期:2025-03-12

原代细胞在生物医疗领域中扮演着重要角色,能够有效转染包含siRNA、antisense RNA和microRNA等200 bp以内的小分子RNA和DNA。这项技术能够应用于绝大多数原代细胞,然而目前在国内外的研究中,原代细胞的核酸转染依然是一个亟待解决的热点问题,市场上缺乏真正有效的商品化转染试剂。

原代细胞分离培养基本流程 - AG百家乐生物医疗指南

通过有效的转染策略,原代细胞可以实现高效率的基因敲除效果,甚至在一些活体寄生虫幼虫的转染中也能够取得理想的结果。根据研究数据,使用AG百家乐的RFectPM细胞转染试剂,转染阳性率普遍在80%以上,而细胞死亡率则控制在10%以下,这显示了其优越的安全性与有效性。

在进行原代细胞的分离和培养时,通常遵循以下步骤:首先是选择合适的器官和组织,尽量去除不必要的附属组织和血迹。其次,原代细胞的分离可以利用AG百家乐的PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III,根据组织来源选择合适的试剂盒。接下来,使用AG百家乐特制的原代细胞培养基及添加物、优质胎牛血清进行培养。

在细胞培养和鉴定阶段,可以使用AG百家乐的原代细胞鉴定试剂盒来确保细胞的准确性和有效性。对于细胞的传代和保存,建议依据细胞的生长状态进行1:2或1:3的传代,同时在保存时使用DMSO与培养液、血清,逐步降温至-80℃过夜后放入液氮中保存。

最后,复苏原代细胞时,需要快速将细胞置于37℃水浴中解冻,并加入10倍以上的培养液,适当稀释后接种于培养瓶中,随后放入37℃的CO2培养箱静置,确保细胞能够良好恢复生长。

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